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短期保存菌种的方法?
将需要保藏的菌种,接种在适宜的斜面培养基上,菌丝长满斜面时,用硫酸纸包扎棉塞或者用无菌硅胶塞代替棉塞,置4℃的冰箱中保藏,叫做斜面(菌种)低温保藏法。由于微生物的新陈代谢活动未停止,试管内培养基易失水变干。因此,低温保藏法的保藏时间较短,不适于长期保藏。每隔3~6个月应转管一次。
羊肚菌菌种保存的最佳方法?
1、保存一般放冰箱,组织分离用组织块在培养基上培养,活力无法保证,注意提纯和保存就是最好的保证活力,保存的方法非常多几十种,菌土接种容易感染,纯度差,切那个部位都是可以的,主要是不要感染就好。 2、干羊肚菌储存,用稍厚一点儿的塑料袋密封就可以。袋里不要有空气,虫子没有空气就活不了了。或者说,把袋子抽真空
保藏菌种的方法有哪些?
保存方法: (一)培养基保存法 利用各种斜面和半固体培养基,加上石蜡油保存菌种,是一种最常用而又简易的保存方法。 1.普通琼脂斜面保存法:肠道杆菌、葡萄球菌等一般细菌可接种于不含糖的普通琼脂斜面上,斜面底部应加少许无糖肉膏汤,以防干涸。经35℃培养18~24h后,移种于4℃冰箱中,一般可保存一个月,每月传代一次。 2.血液琼脂斜面保存法:链球菌、肺炎链球菌应接种于血液琼脂斜面上,35℃培养生长后,置4℃冰箱中保存,链球菌须半个月至1个月移种一次,肺炎链球菌的新分离菌株须2~4天移种一次,以后逐渐延长移种时间,在适应后可延至半个月移种一次。 3.巧克力色斜面保存法:宜保存脑膜炎奈瑟菌,并在35℃孵箱中保存,一般每2天移种一次。 4.鸡蛋斜面保存法:适于保存含有Vi抗原的沙门菌属及其他含表面抗原的细菌,一般可保存一个月。 5.半固体穿刺保存法:将细菌接种于琼脂半固体或血清琼脂半固体内,经35℃培养18~24h,再以无菌方法加入灭菌的液体石蜡。高度约lcm,置4℃冰箱保存。保存时间可达3~6个月。 (二)干燥保存法 原理是将细菌体内的水分蒸发掉,使其处于休眠和代谢停滞状态,从而达到长期保存菌种的目的医|学教|育网搜集整理。菌种干燥后低温保存,可保存数年至十几年。 (三)冷冻干燥保存法 本法又称冷冻真空干燥法。它综合利用了各种有利于菌种保存的因素(低温、干燥和缺氧等),是目前最有效的菌种保存方法之一。用本法保存的菌种具有成活率高,变异性小等优点,保存期一般3~5年,有的可长达10年以上。
微生物菌种保藏方法?
1、传代保藏 传代保藏菌种是微生物保存中最常用的方法之一。很多微生物在低温或者干燥处理时,会很快死亡,为了保存菌种的活性,就要定期不断的进行菌种转接、培养后再保存。 2、斜面低温保藏 将待保藏的菌种接种在合适的斜面培养基上,在相应的条件下培养至得到充足的菌体或者孢子,随后密封试管置于4℃左右保存,具体保存温度按照保存菌种设定。保藏时间依微生物的种类从1个月到4个月不等。 3、冷冻干燥保藏 冷冻干燥保藏法为菌种保藏方法中最有效的方法之一,对一般生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用,这种方法适用于菌种长期保存,一般可保存数年至十余年。我国大多数生物制品菌种都是采用该法保藏。 4、半固体穿刺保藏 配制半固体培养基,高压湿热灭菌后倒于无菌试管中至约1/3,待培养基凝固,用接种环从平面培养基上挑取单菌落,穿入培养基若干次。在合适的条件下进行培养至菌体旺盛生长,之后密封试管,根据菌种特点在4 ℃左右或者凉爽干燥处保存。保存时间至少可以达到1 年,对于有些菌种甚至能达到20 年之久。 5、液氮超低温保藏 液氮超低温保藏法是菌种长期保藏的最有效最可靠的方法。液超低温保藏法是把菌种装在含有冷冻保护剂的安瓶瓶内,将该安瓶瓶放人液氮(-196℃)中保藏。 6、冷冻真空干燥保藏 将处于成熟期的微生物培养物悬浮于无菌的血清、卵白、脱脂奶或者海藻糖等保护剂中制成浓菌液,分装到无菌的安瓿瓶中,于低温冰箱中冷冻,达到预定温度后对浓菌液进行冷冻干燥处理,之后在真空状态下融封安瓿瓶,于20 ℃保藏。 7、蒸馏水保藏 蒸馏水保藏菌种的方法普遍的应用于医学微生物、食品微生物和工业微生物中。将菌体悬浮于蒸馏水中,即可在室温下保存数年,此法应注意避免水分的蒸发。
平菇菌种的保存方法?
1、井底低温贮藏将要贮藏的试管母种,用无菌橡皮塞蘸石蜡封口,装入密闭的广口瓶或塑料袋中扎紧,沉入井底贮藏,可贮藏2~5个月。 2、石蜡封口贮藏把蜡纸裁成6~8厘米见方,放入75%酒精中浸泡l分钟。将已培养好试管种的管口在酒精灯火焰上方旋转灭菌后,用镊子取出蜡纸,扎紧管口。再将包好蜡纸的管口浸入熔化的石蜡中,将蜡纸完全浸入,使蜡纸紧紧封包在管壁上,绝不漏气。待石蜡冷却凝固后,置冰箱或室温下保存。 3、玻璃纸封口贮藏用明胶15克(粘合剂),硫酸铜2克,美蓝1~2滴(指示剂),溶于100毫升热水中,配制成封口剂。将新长满的母种拔去棉塞,管口朝下,蘸上封口剂,贴上用95%酒精浸泡过的玻璃纸,用石蜡熔封。在室温下,菌种至少可保存8个月,并能防止霉菌或螨的浸染。在斜面注入无菌矿油(液体石蜡),可大大延长贮藏时间。 4、厩肥贮藏此法适合贮藏双孢菇等草腐菌类。将腐熟牛粪等堆肥晒干、打碎,取300克干堆肥,用5毫米孔径筛过筛,加1000毫升水调湿,装入试管,占管深1/3~1/2,在0.15兆帕压力下灭菌2小时。确认无菌后,接种,菌丝长满后,放在3℃冰箱内贮藏,每隔2年移植一次。在长期贮藏中,如培养基失水,应将贮藏菌种及时接种在琼脂斜面上进行活化,再继续保存。此法连续贮藏4年后,其生产性状未出现明显变化。
长期保存菌种的方法?
液体石蜡保存法 液体石蜡保存法就是在斜面菌种或穿刺菌种表面覆盖一层液体石蜡,从而隔绝空气,减少菌种及培养物水分挥发,保藏温度要求在4℃下即可。 将培养好的菌种斜面,缓慢倒入无菌的液体石蜡,使石蜡高出斜面顶端1厘米,直立放置,低温保存就可以,霉菌、放线菌、芽孢细菌可保藏2年以上不死,酵母菌可保藏1-2年。 沙土保存法 沙土保藏法是将菌种吸附在适当的载体上,而后进行干燥的保藏。将培养好的菌种接入沙土管内,用真空泵抽气至干。细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏,前两者可保藏2年左右,有些丝状真菌甚至可保藏14-17年之久。 甘油管保存法 甘油管保存是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。配置30%浓度的无菌甘油,将培养好的菌种与甘油充分混合均匀,放入-20℃保存。 冷冻干燥保藏法 冷冻干燥保存法就是将菌种与保护剂混合均匀后,快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分,兼具低温、干燥、除氧三方。干燥后的菌种在真空环境下可长期保存。